11 ส.ค. 2022 เวลา 17:56
Blog ที่ 48 (06/08/2022)ทบทวนบทเรียนภาคปฏิบัติการด้วยการเขียน Material and method ของการทดลองอีกอันหนึ่งที่เลือกจากวิชาแลบที่เรียนในเทอมนี้ หนึ่งปฏิบัติการ เป็นแบบย่อหน้า พร้อมกับอัพโหลดภาพคู่มือต้นฉบับ (ระวังการลอกประโยคโดยตรง จะมีความผิดเกี่ยวกับ Plagiarism)
ปฏิบัตการที่4 การทดสอบลิพิด(Determination of Properties of Lipid)
การแยกลิพิดที่สกัดโดยวิธี Thin layer chromatography
เป็นการทดสอบลิพิดจากสารUnknown ที่ผู้คุมปฏิบัติการที่ได้เตรียมให้นิสิตแต่ละกลุ่มว่ามีองค์ประกอบของสารตัวไหนบ้าง จากสารมาตรฐาน Triolein ,Cholesterol ,Linoleic acid โดยดูผลการทดสอบจากแผ่น TLC
อุปกรณ์และสารเคมี :
1. แผ่น TLC
2. Chromatographic tank
3. Iodine tank
4. ตัวทำละลายผสม chloroform : acetone(96 : 4 )(v/v)
5. สายละลายมาตรฐานที่ทำ chromatography
A. Triolein
B. Cholesterol
C. Linoleic acid
6. สารUnknown
วิธีการทดลอง : เตรียม chromatographic tank
เติมตัวทำละลายผสม chloroform : acetone(96 : 4 )สูงจากก้นขวด 0.5 cm จากนั้นเตรียมแผ่นTLC ใช้ดินสอจุดเบาๆ 4 จุด สูงจากขอบกระดาษด้านล่าง 0.7 cm ขีดเส้นถัดจากขอบด้านบน 0.3 cm จากนั้นหยดสารละลายตามจุดโดยจุดที่ 1-4 หยดสาร Unknown และสารมาตรฐาน A B C ตามลำดับ โดยใช้ capillary type ดูดสารขึ้นมาและหยดสารไปที่แผ่น TLC 2หยด โดยหยดครั้งแรกให้รอสารแห้งก่อนแล้วต่อด้วยหยดที่ 2 และปล่อยให้แห้ง
ใช้ forceps คีบแผ่น TLC ด้านบน นำไปใส่ chloroform tank ในแนวตั้งโดยให้ส่วนที่หยดสารอยู่ด้านล่าง ทิ้งไว้ให้ตัวทำละลายซึมขึ้นมาถึงขีดด้านบนที่เราขีดไว้แล้วใช้ forceps คีบออกมาทิ้งไว้ให้แห้ง ใช้ forcaps คีบไปใส่ Iodine tank รอให้แผ่น TLC มีจุดขึ้นสีเหลืองให้ชัดที่สุด จากนั้นคีบออกมา แล้วรีบใช้ดินสอวงตรงส่วนที่มีสีเหลือง
ใช้ดินสอจุดตรงกลางของวง แล้ววัดระยะห่างจากตรงที่หยดสารกับจุดที่วงว่าห่างกันเท่าไหร่แล้วมาหาค่า Rf และสังเกตว่าสาร Unknown มีค่า Rf ใกล้เคียงกับสารมาตรฐานใดจะได้สารนั้น
โฆษณา