ใช้ forceps คีบแผ่น TLC ด้านบน นำไปใส่ chloroform tank ในแนวตั้งโดยให้ส่วนที่หยดสารอยู่ด้านล่าง ทิ้งไว้ให้ตัวทำละลายซึมขึ้นมาถึงขีดด้านบนที่เราขีดไว้แล้วใช้ forceps คีบออกมาทิ้งไว้ให้แห้ง ใช้ forcaps คีบไปใส่ Iodine tank รอให้แผ่น TLC มีจุดขึ้นสีเหลืองให้ชัดที่สุด จากนั้นคีบออกมา แล้วรีบใช้ดินสอวงตรงส่วนที่มีสีเหลือง
ใช้ดินสอจุดตรงกลางของวง แล้ววัดระยะห่างจากตรงที่หยดสารกับจุดที่วงว่าห่างกันเท่าไหร่แล้วมาหาค่า Rf และสังเกตว่าสาร Unknown มีค่า Rf ใกล้เคียงกับสารมาตรฐานใดจะได้สารนั้น